新生牛血清是一种旨在用于各种动物细胞、胚胎细胞、组织器官的培养以及细
胞融合和单抗制备等。取自出生24小时之内的新生牛,血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。
在细胞培养过程中,应该遇到过使用的新生牛血清系列产生沉淀的问题,溶解后有沉淀,往往还怕是染菌,即使不是染菌有些沉淀在细胞瓶内也会影响生长,注意一些小的细节还是非常有必要的:
一般推荐在-20℃储存新生牛血清系列,避免反复冻融。
解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),非常容易产生沉淀物。
解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。
请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。
新生牛血清系列的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。
若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。
温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。
实验提示
1、建议使用10%的新生牛血清用于常见细胞的体外培养
2、建议使用20%的新生牛血清用于人体正常细胞的体外培养
注意事项
1、操作时,避免污染母液
2、操作时,须戴手套
3、避免反复冻融